|
|
30秒注册登陆，可查看更多信息，结交更多好友，享用更多功能，轻松玩转论坛，白白手拉手欢迎您的加入！
您需要 登录 才可以下载或查看，没有账号？注册新成员
x
自体黑素细胞培养移植治疗白癜风疗效观察
罗卫1, 赵广1, 向培德2, 王雅琴2, 朱美材2
( 1. 中国人民解放军空军总医院皮肤科, 北京100036; 2. 中国人民解放军空军总医院临床实验科, 北京100036)
[关键词] 白癜风; 黑素细胞; 自体移植
[中图分类号] R758.41 [文献标识码] B [文章编号] 1000- 4963( 2006) 06- 0406- 01
2004 年3 月—2005 年6 月, 笔者采用自体吸疱法获取黑素细胞, 经过纯黑素细胞培养、增殖, 在皮损处刮除、种植进行自体黑素细胞培养移植治疗白癜风, 取得了满意的临床效果,现报告如下。
1 病例与方法
1.1 病例
12 例患者均为我院皮肤科门诊就诊的白癜风患者, 其中男5 例, 女7 例, 平均年龄20.10 岁( 15～29 岁) ; 平均病程3.68 年( 2～15 年) 。所有患者色素脱失斑近6 个月内无变化, 整个病程中未出现同形反应。
1.2 方法
1.2.1 黑素细胞的获取采用我科与北京鑫思特科技开发有限公司研制的智能双控表皮分离仪, 负压45 kPa, 温度40 ℃, 孔径1.2 cm, 在腹部正常皮肤部位吸疱4～7 个, 用虹膜剪沿水疱壁边缘剪下疱壁, 放入含MEM培养液的无菌培养瓶中; 无菌敷料包扎吸疱区。
1.2.2 纯黑素细胞的培养与增殖将疱壁剪碎放入无菌试管,加入0.25%胰酶室温消化30～60 min, 轻轻吹打使细胞分散,见试管内液体混浊后即加入适量血清终止消化, 1 000 r/min离心10 min 弃上清, 缓冲液冲洗后再次离心和弃上清, 加入M2 细胞培养液中( Sigma 公司) , 定期更换培养液, 显微镜下观察黑素细胞生长及增殖情况, 根据皮损面积大小和所需黑素细胞数目进行黑素细胞计数与传代, 一般传3 代或4 代, 多时达5 代或6 代。
1.2.3 黑素细胞的移植移植区常规消毒后采用刮除法处理移植区, 深度以可见点状毛细血管出血为度, 将黑素细胞种植于移植
区创面, 细胞密度为(8～10) ×104 个/cm2, 油纱布和含有培养浸液的无菌纱布覆盖创面, 待患者休息0.5 h 后用无菌敷料包扎。
1.2.4 临床疗效判断标准痊愈: 移植区白斑消失, 肤色完全恢复正常。显效: 移植区白斑面积缩小>50%, 色素较浅或有逐渐
变深趋势。有效: 移植区白斑面积缩小10%～50%; 无效: 移植区白斑变化不明显, 白斑面积缩小<10%。痊愈加显效例数的百分
比计为有效率。
2 结果
12 例白癜风患者共有18 块皮损进行了黑素细胞移植, 其中15 块皮损进行了自体黑素细胞培养移植, 移植后痊愈11 块(73.33%), 显效2 块(13.33%), 有效1 块(6.67%), 无效1 块(6.67%), 有效率为86.67%。最大移植面积25 cm2, 最小移植面积12 cm2, 移植后随访3 个月~1 年余。12 例患者无论供皮区还是移植区均无瘢痕形成, 供皮区未发生同形反应。
3 讨论
白癜风临床治疗较困难, 自体黑素细胞培养移植治疗是目前比较前沿的治疗方法之一。黑素细胞大多在正常手术切除的皮肤中获取[1], 但反复取皮易使局部遗留瘢痕, 而使患者难以接受。原代黑素细胞培养需要手术切除较大的正常皮肤, 而且获得的黑素细胞有限[2], 不能治疗较大面积的皮损。在黑素细胞的移植方法上目前大多采用负压吸疱移植法和超脉冲二氧化碳或铒激光处理移植区法, 其中负压吸疱移植与自体表皮移植的效果相同, 在疱与疱之间均留有间隙[3]; 激光处理受皮区同样存在技术难度较大, 设备费用较高, 眼睑等特殊部位皮损治疗困难等限制了这一技术的开展与应用。笔者用自体黑素细胞培养移植治疗白癜风的体会是: ①负压加温吸疱获取黑素细胞无痛苦, 不需要**, 操作简单, 并且可以反复取皮, 术后无瘢痕形成, 因此患者易于接受[4]; 为了不影响黑素细胞的存活, 应尽可能缩短吸疱时间; ②纯黑素细胞培养与增殖的方法能获得较理想数目的黑素细胞, 使一次性的移植面积明显扩大, 缩短了治疗时间。白癜风患者正常部位的黑素细胞繁殖能力相当于正常人的25%～50%[5]。笔者在培养过程中也发现, 黑素细胞的繁殖能力存在一定的个体差异; ③移植区刮除移植法是通过不断改进与创新的一种黑素细胞移植法, 操作方法比较简单, 移植后的色素分布均匀, 对于面部某些特殊部位的白癜风皮损( 如眼睑、鼻部) 采用此移植法能取得比较理想的治疗效果。
参考文献
[1] 许爱娥, 尉晓东, 程东庆, 等. 表皮细胞悬液移植治疗白癜风[J].中华皮肤科杂志, 2000, 33(4): 249- 250.
[2] 徐小珂, 何威, 张春明, 等. 黑素细胞原代培养移植治疗节段型白癜风[J]. 临床皮肤科杂志, 1996, 25(6): 379- 380.
[3] 高天文. 挑战白癜风[J]. 第四军医大学学报, 2001, 22(24):2213- 2215.
[4] 罗卫, 梅英杰, 赵广. 自体表皮植治疗白癜风55 例疗效观察[J].临床皮肤科杂志, 2000, 29(3): 165- 166.
[5] Olisson MJ, Huhlin L. Transplantation of metanocytes in vitiligo[J]. Br J Dermatol, 1995, 132( 4) : 587- 591.
|
|
发表于 2013-5-5 23:47:34
楼主
发表于 2013-5-6 11:27:01