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本文就白癜风的表皮移植治疗进展做一综述。 一、白癜风的表皮移植治疗是外科疗法。 (白癜风的手术治疗即指外科疗法,)适用于对药物治疗和光疗无效的稳定期或节段型白癜风患者,通常采用将自体或异体带有黑素细胞的表皮或纯黑素细胞移植到缺乏黑素细胞的白斑部位,黑素细胞成活并能制造黑素,是治疗白癜风的一个突破性进展。1971年,FaIabella首先报道用负压吸疱法进行自体表皮移植成功,1988年国内开始有用表皮移植治疗白癜风的报道,近年来,已有大量关于自体表皮移植治疗的报道。包括白体表皮移植法、薄层削片法、全厚层钻孔法、单株毛发移植、自体黑素细胞培养后移植、表皮细胞混悬液移植等多种治疗办法 1.自体表皮移植 采用患者自身健康部位表皮移植到白斑部位,具体方法是:利用负压吸疱法或液氮起疱法分别在健康部位(一般在腹部)和白斑部位发疱,调整负压在45—80 kPa。110—115即可形成大疱,水疱正好在表皮、真皮之间产生,疱顶为表皮,用眼科剪刀先将白斑区疱顶表皮除去,露出真皮面,再将健康部位水疱顶表皮剪下,将其平整移植于白斑的裸露面上,用消毒纱布包扎即可。操作时注意无菌技术。大部分病例在2周左右局部开始有色素再生,并继续扩大,3—6个月色素扩大达最大限度,最大可达原来的一倍。成功率在90%左右。在移植过程中,有报道加用黑素生成素(Melag-enine)、嗜碱性成纤维细胞生长因子(BFGF)、内皮素(ET)可以提高疗效,增加移植成功率。 2.表皮细胞培养移植方法 ①应用组织工程学的方法,在体外模拟环境下培养表皮细胞,然后与可被人体降解吸收的细胞外基质组成复合物移植到创面,最终达到修复创面、改善外观的目的 ②培养方法可分为体外培养和体内培养。具体方法是:取一小片患者自身健康皮肤,用胰酶消化,分离出表皮并获得表皮细胞悬液后,借助载体膜将其置于培养基中,培养液每周更换两次,21d后获得带有黑素细胞的表皮片,将其平整的置于事先准备好的皮损裸露面。复色发生在移植后3—6个月,其成功率约33%一54%。Andreassi等将一种支持细胞培养的新型材料即经苯甲醇完全酯化的透明质酸生物聚合膜应用于本疗法中,治疗了11例非泛发型白癜风患者,取得了满意的疗效。 3.表皮细胞悬液移植即非培养的黑素细胞移植 1992年Gauthier等首先报告用含角质形成细胞的非。培养黑素细胞移植治疗白癜风获得成功。 具体方法 ①将所取表皮置于5mL离心管中,加入0.25%胰蛋白酶5mL,置于4oC冰箱冷消化4-8h,再置于37℃恒温箱中消化30min,用吸管反复吹打成单细胞悬液,2000f/min离心5min,弃上清液,再加人5mL10%RPMl1640细胞培养液将沉淀制备成细胞悬液(主要含角质形成细胞和黑素细胞),采用血细10-1胞计数板测定细胞浓度,调整细胞浓度为1×10 L。 ②移植:将白斑区用1%利多卡因局麻后,用皮肤磨削机打磨白斑区表皮,至出现针尖样出血点。将所制备的细胞悬液均匀涂布于打磨后的受皮区创面,并用凡士林薄纱条覆盖,纱布包扎固定,10d后除去包扎纱布。移植后3周左右,局部出现点状色素沉着,逐渐融合向外扩大,二三个月可形成1倍于水疱面积的色素斑。成功率超过70%。移植前不将角质形成细胞从黑素细胞中分离出来是因为:角质形成细胞可以通过产生各种细胞因子来维持黑素细胞正常的生长与功能。 4.自体培养的黑素细胞移植 包括纯黑素细胞培养移植和黑素细胞与角质形成细胞共培养移植,这是一种依靠细胞体外培养技术来增加黑素细胞数量,然后移植到患者白斑区的治疗方法。1987年Le-mer等首次应用培养的自体黑素细胞移植治疗白癜风获得成功。方法:取患者自身皮肤,置于培养液中.以胰酶消化后,分离出表皮,反复吹打制成单细胞悬液,接种于培养基内,一般培养后第3 d即可见到树枝状细胞生长,3-4周后细胞触合交织成网状,4周后培养的细胞增殖约达61×10,然后将培养的细胞悬液注入白斑内。1992年,Gauthier等首先报道用含角质形成细胞的非培养黑素细胞移植治疗白癜风。经不断改进,Mulekar提出了一种较完善的自体表皮细胞悬液移植治疗白癜风的技术,其方法是:用植皮刀切取一很薄层表皮(大约200μm);在DMEM/F12培养基中反复吹打得到表皮细胞悬液;均匀涂于高速皮肤磨削机磨削的白斑区;覆盖胶原。 5.异体黑素细胞移植方法同自体黑素细胞移植,不同点:不是取自身表皮而是取其他健康人正常皮肤作为供体,培养出黑素细胞后制成悬液注人白斑内。 6.钻孔皮肤移植法亦称自体微移植,适用于治疗皮损位于指,趾等不平整部位或面积较大的患者。手术采用环钻打孔取材,深约2~3mm。操作简单易行,但综合疗效略逊于自体表皮移植。 7.薄层削片法植皮刀在供皮区取皮,以稍见点状出血为好。殁皮区皮肤磨削至表、真皮交界处,将皮瓣移植到皮损区后包扎创面即可。 二、白癜风表皮移植治疗的并发症和处理 细胞移植常见的并发症有:瘢痕、圆点状瘢痕、色素沉着过深或过浅、瘢痕疙瘩或肥厚性瘢痕、感染和皮肤坏死。不管何种移植方法,在移植后的几天内都需要适当的固定,以防植皮的丧失及移植细胞分布不均。在移植后.1周内,预防性的外用抗生素以防止术后感染。当移植部位发生在面部,若患者以往有单纯疱疹的病史;则应该预防性的使用抗病毒药物。为了提高色素的扩散,部分色素可以消失等,需与非手术治疗相结合,可同时应用内服、外用药物及紫外线照射等。目前国内外学者采用联合方法治疗白癜风的报道较多。 1.与NB—UVB联合 Lahiri等观察了采用NB—UVB联合自体表皮移植的66例处于稳定期的顽固性白癜风患者,这些患者的108处皮损均先进行自体皮片钻孔移植,然后进行亚红斑剂量的NB—UVB照射。发现57咧患者成功再着色。作者认为NB—UVB联合钻孔移植是一项简单、安全、价廉、有效的治疗静止期顽固性白癜风的疗法。 2.与PUVA联合 Gupta等对26例稳定期口唇部白癜风患者的31处口唇皮损进行研究。先在大腿侧面制造负压水疱,水疱顶部被转移至磨削过的受体区,8d后去除敷料和移植皮片,然后进行6周的光化学治疗。经过6周及以上的随访,发现23例患者的27处口唇皮损完全恢复着色,多数剩余皮损处也有微小色素沉着。作者认为自体黑素细胞移植联合PUVA是一种安全有效的治疗口唇部稳定期白癜风的方法。 3.与激光联合 VanGeel等将40例难治性稳定期白癜风患者的皮损处预先进行激光表浅刮擦,然后将非培养的自体黑素细胞和角质形成细胞转移至透明质酸酶浓缩悬液中,接着移植到激光处理过的皮损处,移植后3一12个月,使用数字图像分析系统评估皮损的再着色。最后发现有62%的患者再着色面积超过70%。 4.与皮质类固醇激素联合 Mulekar对进行自体非培养的表皮细胞一黑素细胞混悬液移植法治疗失败的17例寻常型和8例节段型白癜风患者给予2~10个月的小剂量倍他米松口服治疗后,在原治疗部位或未治疗部位再次行移植复色。结果除2例寻常型和1例节段型白癜风患者治疗失败外,其余15例寻常型和7例节段型白癜风患者均获得较好的复色。
三、白癜风表皮移植治疗的优、缺点比较这几种方法,各有优、缺点。 1.自体表皮移植方法简单,疗效好,不要求很高的条件,便于推广。国内、外文献报道有效率为90%左右。缺点是需同时在自身皮肤发疱取表皮。 2.表皮细胞培养移植其优点:取较小的皮片即可治疗较大面积的白斑,且无瘢痕形成。缺点:技术要求高,暂时会出现色素沉着过深,但几个月后能自行消失。 3.自体表皮细胞悬液移植方法取皮区相对较小,安全性好,操作简便,治疗稳定期白癜风有很好的疗效。与自体表皮移植治疗白癜风的方法相比,治疗面积明显扩大。对于大面积白斑和一次治疗不理想的患者还可进行多次移植治疗。不足之处是易产生点状色素沉着,着色不均匀,与周围正常皮肤的色素有一定的差异,这些有待进一步研究、改进。 4.自身黑素细胞移植疗效肯定,且仅取一小片皮肤即可进行多处移植,方便患者。缺点是要求条件高,要有细胞培养实验室及相应的人力、物力、技术等各方面的条件旧¨。另外,细胞培养液中的TPA能够有效的促进黑素细胞的增殖,但是存在致癌的危险性,黑素细胞经含TPA的培养基中培养后移植的安全性尚待进一步探讨。目前还只处于实验研究阶段,暂时不能大量应用于临床。 5.异体黑素细胞移植有很好的应用前景,移植异体黑素细胞可以解决对大面积皮片的需求,建立一个细胞库,可以避免自体取皮。但目前皮肤排斥反应问题还没有完全解决,有些单位正在研究。已有个别成功病例的报道,但尚需对更多病例观察和研究。 6.钻孔皮肤移植法与薄层削片法,操作简单易行,但综合疗效略逊于自体表皮移植。但是,不管采用何种移植都应该小心谨慎,因为关于细胞移植的临床经验并不多,有的还在研究和探索阶段。 四、小结 表皮移植作为一个治疗方法,对白癜风是有效的。它的适应证是稳定期(静止期)患者,对进展期(活动期)患者,最好不要做表皮移植,首先是效果不好、成活率低,其次病变还在扩大,局部移植解决不了问题,还可能发生同形反应,反而使白斑扩大。因此,对进展期患者,用其他方法(如药物)治疗控制病情后,才能考虑表皮移植。表皮移植对局限型、节段型患者效果最好,对病变广泛的散发型、泛发型患者,具体操作会有些困难,因此,应采取综合疗法。
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